麻醉后的大鼠固定于腦立體定位儀，具體操作為大鼠上門(mén)齒卡入橫桿，調(diào)節(jié)旋鈕壓緊鼻桿；將耳桿插入大鼠耳道，平衡調(diào)節(jié)左、右耳桿，使大鼠兩耳間連線與耳桿在同一直線上，保證左、右耳桿的刻度位置相同后調(diào)節(jié)旋鈕鎖緊耳桿。大鼠固定完好的判斷標(biāo)準(zhǔn)：鼻對(duì)正中，頭部不動(dòng)，提尾不掉，目測(cè)大腦放置水平（使顱骨水平）。

眼科剪縱向剪開(kāi)大鼠頭部皮膚約3cm，用鑷子沿顱骨表面剝離骨膜結(jié)締組織并剪除，用無(wú)菌棉球蘸去浸出的血液，將顱骨表面清理干凈，暴露前后囟。

調(diào)節(jié)腦定位儀上橫縱坐標(biāo)旋鈕使牙科微孔鉆位于前囟點(diǎn)上方并輕觸該點(diǎn)，以Bregma點(diǎn)作為三維坐標(biāo)系的參考點(diǎn)（零點(diǎn)）。

根據(jù)注射位置的不同，及大鼠重量的不同，注射坐標(biāo)不同。此處以普通SD大鼠（350±50g）側(cè)腦室注射為例，通過(guò)查詢腦立體定位圖譜確定需要定位的核團(tuán)位置，確定坐標(biāo)值，即ML值（X軸）、AP值（Y軸）、DV值（Z軸）。側(cè)腦室位置為前囟點(diǎn)旁開(kāi)1.5mm，向后囟方向1.1mm ，深4.5mm（坐標(biāo)即為±1.5，-1.1，-4.5）。調(diào)節(jié)X軸（1.5個(gè)單位）及Y軸（1.1個(gè)單位）旋鈕移動(dòng)操作臂到坐標(biāo)位置，使用微孔牙科鉆緩慢打孔。鉆孔另一種操作法為確定鉆孔位置后在該點(diǎn)蘸墨打點(diǎn)標(biāo)記，后手持牙科鉆進(jìn)行鉆孔。顱骨鉆穿時(shí)有明顯落空感，此時(shí)應(yīng)小心操作避免傷及硬腦膜。

固定微量注射器，調(diào)節(jié)Z軸旋鈕（4.5個(gè)單位）使微量注射器針頭插入側(cè)腦室。進(jìn)行緩慢注射，注射速度2 ul/min，注射劑量視具體實(shí)驗(yàn)而定，一般在5ul左右。

注射完成后留針靜置10min以便藥液充分吸收。緩慢調(diào)節(jié)Z軸旋鈕向上拔出針頭，鉆孔處涂抹骨蠟。

縫合皮膚，完成腦定位注射。